酶聯(lián)免疫試劑盒大部分人在做檢測的時候，都不太注意ELISA試劑盒中檢測操作步驟，內(nèi)心感覺都知道，都懂的。但就是因?yàn)檫@種心理，所以造成有時候的檢測結(jié)果出現(xiàn)失誤和錯誤的結(jié)果。生物檢測本就是個很嚴(yán)肅并且嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鳎蚰囊粋€小小的疏忽和大意可能就會造成意想不到的錯誤。
正確的使用酶聯(lián)免疫試劑盒的步驟：
1.在使用之前要將試劑充分的混合均勻，但是要注意在搖晃的時候不要產(chǎn)生過多的泡沫，從而造成有太多的空氣進(jìn)入試劑中，產(chǎn)生測試誤差。
2.根據(jù)要檢測樣品的數(shù)量來確定的板條數(shù)。每個比對的樣品和空白孔是做復(fù)孔，而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定，不過能用復(fù)孔的還是用復(fù)孔。將標(biāo)本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應(yīng)孔中。
3.在反應(yīng)孔中在加入50微升的待測樣品，然后馬上加入50微升的生物素標(biāo)記抗體，蓋上模板，輕輕搖晃使其混合均勻后，在37攝氏度的恒溫下等待1小時。
4.將孔內(nèi)液體甩去，加滿洗滌液，震蕩約30秒后，在甩去洗滌的液體，用紙將水吸干。這樣子重復(fù)三次。再在沒空加入80微升的親和鏈酶素-HRP，同上混合均勻后，在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等待半小時。
5.同步驟四的洗滌方法。洗滌干凈后，在沒空中加入底物A,B各50微升，小心混合均勻，避免光照在37攝氏度下等待10分鐘。
6.取出酶標(biāo)板，迅速加入終止液50微升，測定結(jié)果。在450納米的波長處檢測各個孔的OD值。
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