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上海恒遠為您分享:如何確定抗體的Z佳稀釋度比例

更新時間:2017-08-10 點擊量:3160

    大家在稀釋抗體的時候,有的抗體說明書中有推薦稀釋比例就按照該比例稀釋進行實驗,但是有的抗體說明書沒有推薦稀釋比例,那么我們就需要做大量的預實驗來摸索*的比例了。

    一般來說,抗體說明書都會提供一個稀釋度范圍,但是,有些公司生產的抗體,其說明書上沒有提供抗體稀釋度。這是可以理解的,因為如果說明書上標明的抗體稀釋度如果高的話,就說明這種抗體效價不高,質量不好。為此,實驗者可以先在網上搜索一些相關的文獻,文獻的方法與材料中一般會把抗體來源以及稀釋度都詳細的標出的。但真正做實驗時,還是要根據自己實驗樣品的情況和檢測指標表達的豐富程度等因素先摸索一下抗體的稀釋度的。

    所以在做預實驗時,就采用倍比稀釋法,先做一個梯度,比如1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600. 看看在這幾個梯度范圍內,樣品中的目的蛋白的表達情況,然后再從中確定你認為的稀釋度進行正式實驗,這樣做比較好一些。由于標本類型、實驗條件、操作環境等各種因素的影響,推薦濃度僅作為參考。

一抗稀釋液一般為PBS/0.4% Triton X-100/1%BSA。

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